Inhalt
- Bessere Visualisierung
- Identifizierung und Klassifizierung
- Nachweis der Lebensfähigkeit
- Identifizierung zellulärer Strukturen
Mikrobiologen untersuchen die Eigenschaften von Mikroorganismen wie Algen, Protozoen, Bakterien, Pilzen und Viren mit einem Mikroskop. Während einige Organismen wie Protozoen und Hefezellen mit einem feuchten Reittier leicht zu beobachten sind, müssen Bakterienzellen angefärbt werden. Die Wissenschaftler entwickelten verschiedene Methoden wie Gram-Färbung, säurefeste Färbung und Fluoreszenzfärbung zur besseren Visualisierung von Bakterienzellen und Zellstrukturen. Mit solchen Färbemethoden können strukturelle Merkmale identifiziert werden, die zur Klassifizierung von Bakterien beitragen.
Bessere Visualisierung
Bakterienorganismen sind so klein, dass die meisten von ihnen nur unter einem Mikroskop mit einer 1000-fachen Vergrößerung sichtbar sind. Die bloße Vergrößerung der Größe bietet jedoch keinen ausreichenden Grad an Klarheit, so dass Bakterien vor der Beobachtung gefärbt werden müssen, um die für die Visualisierung erforderliche Klarheit zu erzielen.
Identifizierung und Klassifizierung
Die Färbung von Bakterien zur Unterscheidung von Bakterienarten wird als Differenzialfärbung bezeichnet. Die Gram-Färbung ist eine solche Differenzfärbung, die Bakterien anhand ihres Zellwandgehalts unterscheidet. Bei dieser Methode reagieren die Bakterienzellen mit einer Kristallviolettfärbung und nehmen eine violette Farbe an. Durch die Zugabe eines Entfärbungsmittels verlieren einige Bakterienzellen ihre Farbe, während andere dies nicht tun. Bei Zugabe von Safranin färben sich die entfärbten Zellen rot, während die nicht verfärbten Bakterienzellen violett bleiben. Die Bakterienzellen, die die rote Farbe annehmen, werden als gramnegative Organismen bezeichnet, und diejenigen, die die Farbe nicht annehmen, werden als grampositive Organismen eingestuft. Die Gram-Färbung bietet eine schnelle Methode zur anfänglichen Identifizierung von an Infektionen beteiligten Bakterien. In ähnlicher Weise hilft das säurefeste Färbeverfahren bei der spezifischen Identifizierung der Organismen, die zur Klasse der als Mycobacteria bezeichneten Bakterien gehören, wie Mycobacterium tuberculosis.
Nachweis der Lebensfähigkeit
In Bakterienkulturproben ist es oft wichtig, das Vorhandensein lebender Bakterienzellen nachzuweisen. Färbemethoden wie Fluoreszenzfärbung helfen zu identifizieren, ob Kulturzellen lebensfähig sind oder nicht. Lebende Bakterien haben die Fähigkeit, die 5-Cyano-2,3-ditolyltetrazoliumchlorid-Färbung (CTC) in einen Farbstoff umzuwandeln, der eine rote Fluoreszenz zeigt. Wenn mit CTC gefärbte Kulturen eine solche Fluoreszenz emittieren, deutet dies auf das Vorhandensein lebensfähiger Bakterien hin. Propidiumiodid ist eine Färbung, die nur auf nicht lebende Zellen wirkt, die beschädigte Membranen besitzen, und daher zur Identifizierung toter Bakterienzellen nützlich ist.
Identifizierung zellulärer Strukturen
Die Färbung bietet eine Methode zur übersichtlichen Darstellung mehrerer Zellstrukturen. Mit der Fuelgen-Färbemethode kann beispielsweise der Zellkern in Bakterienzellen identifiziert werden, während die Albert-Färbung bei der Visualisierung von metachromatischen Granulaten hilfreich ist. In ähnlicher Weise ermöglicht die Silberimprägniertechnik die Identifizierung von Spirochäten. Flagellen sind leicht zu beobachten, wenn sie mit Ryus Fleck befleckt sind. Malachitgrün-Färbung hilft bei der Identifizierung von Bakteriensporen.