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HPLC (Hochleistungsflüssigkeitschromatographie) und GC (Gaschromatographie) sind beide Methoden, mit denen Wissenschaftler Proben analysieren, um festzustellen, was die Probe enthält oder wie hoch die Konzentration der Moleküle in der Probe ist. Beide verwenden dasselbe Prinzip, dass schwerere Moleküle langsamer eluieren oder fließen als leichtere (die Polarität spielt auch eine Rolle in der Elutionszeit). Obwohl die Idee dieselbe ist, unterscheiden sich GC und HPLC in mehreren Punkten.
Die mobile Phase
Die mobile Phase von Chromatographiegeräten ist die Substanz, die die Probe durch die Maschine bewegt. Bei der HPLC ist die mobile Phase eine Flüssigkeit, die aus einem organischen Lösungsmittel, hochreinem Wasser und anderen Bestandteilen besteht, um die Verträglichkeit mit der Probe zu gewährleisten. GC verwendet Gas für seine mobile Phase. Zu den verwendeten Gasen gehören Helium, Stickstoff, Argon oder Wasserstoff, je nachdem, was analysiert wird.
Die Spalten
Während sich die Proben über Chromatographiesäulen bewegen, interagieren die Probe und die mobile Phase mit dem Säuleninhalt, wodurch die Komponenten der Probe zu unterschiedlichen Zeiten eluieren. HPLC-Säulen sind typischerweise vier bis sechs Zoll lange Metall- oder Glasröhrchen, die dicht mit Siliciumdioxid oder unterschiedlichen Kohlenstoffkettenlängen gepackt sind. GC-Systeme verfügen über gewickelte Kapillarsäulen mit Innenwänden, die je nach Laboranforderungen mit verschiedenen Materialien beschichtet sind. Ausgestreckt können GC-Säulen Längen von 100 Fuß erreichen.
Die Beispiele
GC wird für flüchtige Verbindungen (solche, die sich schnell zersetzen) verwendet, während HPLC für weniger flüchtige Proben besser ist. Wenn eine Probe Salze enthält oder eine Ladung enthält, muss sie mittels HPLC und nicht mittels GC analysiert werden.
Temperaturkontrolle
GC-Säulen sind in einem Ofen in der Maschine untergebracht. Ein Computer ändert die Temperatur, während die Proben analysiert werden. Je höher die Temperatur, desto schneller eluiert die Probe. Zu hohe Temperaturen führen jedoch zu schlechten Ergebnissen. HPLC-Säulen werden jederzeit auf einer stabilen Temperatur (meistens Raumtemperatur) gehalten.