Kalibrierungskurven werden verwendet, um die Konzentration unbekannter Substanzen basierend auf früheren Messungen von Lösungen mit bekannten Konzentrationen zu bestimmen. Die Genauigkeit und Genauigkeit der Messungen hängt von der Kalibrierungskurve ab. Je besser die Kurve, desto genauer die Antwort, desto schlechter die Kurve, desto schlechter die Genauigkeit. Dies ist eine Art Vergleichsmethode, bei der Unbekanntes mit Bekanntem verglichen wird.Kalibrierungskurven werden für alle Arten von Messungen mit vielen verschiedenen Maschinen verwendet. In diesem Beispiel wird ein Spektrophotometer verwendet.
Verdünnen Sie die Standardlösung auf verschiedene Konzentrationen. Es ist typisch, eine 10-fache Verdünnung, 20-fache Verdünnung, 30-fache Verdünnung oder eine andere schrittweise Lösung durchzuführen. Führen Sie jede Verdünnung zweimal durch, damit alle Proben doppelt vorhanden sind.
Berechnen Sie die Konzentrationen der verdünnten Lösungen. Ein Beispiel für die neue Konzentration für die 10-fache Verdünnung wäre die Konzentration der ersten Lösung multipliziert mit 0,10.
Lesen Sie die Saugfähigkeit der verdünnten Lösungen auf dem Spektralphotometer ab. Setzen Sie eine Küvette so in das Spektralphotometer ein, dass die Dreiecksmarkierung mit dem Lichtweg übereinstimmt. Schließen Sie den Deckel des Spektralphotometers und drücken Sie die Null-Taste. Die Maschine alle fünf Proben mit destilliertem Wasser auf Null stellen. Sobald die Maschine auf Null gestellt ist, lesen Sie die Proben auf die gleiche Weise ab. Der einzige Unterschied ist, dass Sie die Eingabetaste drücken, um die Saugfähigkeit zu ermitteln. Drücken Sie die Eingabetaste, nachdem Sie den Deckel geschlossen haben. Notieren Sie diese Werte in einem Notizbuch.
Zeichnen Sie das Absorptionsvermögen gegenüber den berechneten bekannten Konzentrationen für alle Proben auf. Die bekannte Konzentration liegt auf der X-Achse und die Saugfähigkeit auf der Y-Achse. Es ist am besten, die Grafik in einem Computergrafikprogramm zu erstellen.
Verwenden Sie das Grafikprogramm, um die Regressionsgerade für die grafisch dargestellten Punkte zu berechnen. Es ist möglich, einen der beiden Punkte für jede Verdünnung zu löschen, um die beste Regressionsgerade zu erhalten. Dies ist der Punkt, an dem jede Verdünnung doppelt durchgeführt wird. Je näher der R ^ 2-Wert an eins liegt, desto besser ist die Regressionsgerade. Notieren Sie sich die Regressionsgeradengleichung.
Lesen Sie das Absorptionsvermögen der unbekannten Konzentrationslösung auf dem Spektrophotometer ab. Notieren Sie diese Saugfähigkeit.
Berechnen Sie die Konzentration der unbekannten Lösung mithilfe der Regressionsgeradengleichung. Das unbekannte Absorptionsvermögen wird in der Gleichung durch Y ersetzt. Sie lösen die Gleichung für X, die Konzentration.